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IAC-SEP黃曲霉毒素B1免疫親和柱
(產品編號:IAC101)
使用對象
IAC-SEP®CLOVER黃曲霉毒素B族免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的AFB1。黃曲霉毒素B1免疫親和柱廣泛地應用于糧食、食品、飼料、堅果、花生、醬油、醋、辣椒、胡椒、藥材和酒類等樣品的提取,該方法速度快、操作簡單、準確性高,對準確靈敏的測定樣品中中的AFB1起到十分重要的作用。
IAC-SEP<蘇p>®黃曲霉毒素B1免疫親和柱適用于以下標準:
GB/T 18979-2003 食品中黃曲霉毒素的測定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法
SN/T 1101-2002 進出口油籽及糧谷中黃曲霉毒素的檢測方法
原理
樣品經甲醇+水提取液提取、過濾、稀釋,然后通過鍵合有黃曲霉毒素B1特殊抗體的免疫親和柱。此時,AFT被親和柱中的抗體特異性的吸附,用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質除去,然后用甲醇使抗體變性,從而將黃曲霉毒素B1從親和柱上洗脫下來。后,用HPLC或熒光計進行定量檢測。
儲存條件
該親和柱保存在2-8 °C條件下,不能冷凍,保質期為18個月。建議在室溫(18-30°C)下使用。
實驗溶液制備
提取液,甲醇/水(8+2):取80mL甲醇加20mL水,混合均勻。
甲醇/水(7+3):取70mL甲醇加30mL水,混合均勻。
HPLC流動相,甲醇/水(45+55):取450mL甲醇加550mL水,混合均勻,用0.22微米的尼龍篩過濾。
標準溶液的配制:取黃曲霉毒素B1儲備液,流動相為稀釋液,配制標準品溶液。
注:配制好的標準品溶液2-8℃冷藏保存有效期為24h。
pH 7.0 PBS溶液:稱取8.0g氯化鈉,1.44g磷酸氫二鈉,0.24g林酸二清鉀,0.2gkcl,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調節pH值至7.0,后用純水稀釋至1000mL。
0.1%的吐溫/PBS:將1.0mL吐溫-20加入到1L pH 7.0 PBS溶液中,混勻。
液相色譜條件
色譜柱:Cloversil-C18 4.6*150mm(5um)或4.6*250mm(5um)
流動相:甲醇-水(45+55,v/v)
流速:0.8mL/min
檢測器:熒光檢測器,激發波長360nm,發射波長440nm
進樣體積:20~100uL
光化學衍生化系統:CLOVER UVD光化學衍生器(連接于色譜柱后,然后通向熒光檢測器)
不同樣品的操作步驟聯系客服索要說明書
注意事項
樣品添加回收試驗時,標準品添加到樣品中,靜置2小時后或過夜,再進行樣品前處理,否則會出現回收率偏低的現象。
不要隨便更改操作說明書中的操作步驟,如需更改要和本公司技術部聯系,確認更改是否合理。
操作步驟中,樣品過柱,淋洗,洗脫時,一定要控制好流速,不能太快,否則會使檢測結果偏低。
如果將標準品直接過柱驗證回收率時,一定要確保標準上柱液中甲醇濃度不要超過25%,否則會影響柱子的吸附能力。
試驗中使用的玻璃儀器等,一定要清洗干凈,尤其是用次氯酸等處理過的儀器,否則會使檢測結果偏低。
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品牌:科樂福clover
生產廠家:北京中檢維康生物技術有限公司